核苷三磷酸(NTP)參與磷酸化反應,其中磷酸基團通過激酶從NTP轉移到底物上。在激酶反應中提供的NTP的γ磷酸結合于電活性標記,導致該γ磷酸-電活性標記結合物從NTP轉移到底物。電活性標記是一種有機部分,如醌或硝基雜環,或者是一種金屬茂,如二茂鐵或二茂鈷。一旦γ磷酸-電活性標記結合物通過激酶轉移到電極結合的底物,磷酸化的發生就通過循環伏安法進行電化學檢測。磷酸化也能夠通過對攜帶了結合電活性標記的γ磷酸的底物進行質譜分析來檢測。含有γ磷酸-電活性標記結合物的NTP適用于檢測樣品中激酶存在的方法,篩選調節激酶活性的候選化合物的方法,以及適用于診斷與激酶相關的疾病的方法。
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