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基于正負電荷吸附原理的外泌體分離裝置

957   編輯:中冶有色網   來源:中國科學院大連化學物理研究所  
2023-10-23 11:52:08
1.本發明涉及高分子材料的設計、加工、制作和應用技術領域,特別提供了一種基于正負電荷吸附原理的外泌體分離富集裝置及其制備方法。 背景技術: 2.外泌體是細胞經過“內吞 ? 融合 ? 外排”等一系列調整過程而形成的細胞外納米級囊泡。其在人體內分布廣泛,人體的尿液、汗液、血液、乳汁等均含有外泌體。近年來的研究表明,外泌體會作為細胞之間物質代謝和信號傳遞的途徑,且既參與疾病的發生,又參與免疫調節。外泌體生成機制表明,通過分析外泌體的組分,可以幫助識別其來源的細胞類型。于是外泌體可作為液體活檢的重要生物標志物,用于癌癥早期臨床診斷;也可作為一些疾病的預后標志物,用來評估藥物療效或監控病情進展。此外,一些研究表明,小鼠體內外泌體的免疫原性比脂質體低,穩定性高,因此可通過修飾處理作為潛在的藥物載體;也有研究表明,干細胞外泌體本身就具有促進再生、抑制凋亡、調節免疫等療效,因此外泌體在一些神經退行性疾病中也有著廣泛的應用前景。 3.然而,由于外泌體的尺寸小且與血液中的其他復雜物質特征相近,高效分離外泌體極具挑戰性。目前,基于密度分離的超速離心法是最常用的外泌體分離方法,被譽為分離外泌體的“金標準”。但超速離心法分離外泌體耗時長,需要大型儀器成本高,回收率與分離純度也比較低?,F已有許多基于不同原理的其它被報道過的外泌體分離方法,如基于抗原抗體反應的免疫分離、基于尺寸的超濾分離與尺寸排阻層析、基于親疏水性質的聚合物沉淀分離以及各種新型的依靠流體力學的微流控方法等,各有各的優勢與不足。 4.由于外泌體膜帶有負電荷,基于電荷的方法近年來逐漸被重視。已有使用電泳等方法使外泌體在電場中分離的報道,也有修飾聚賴氨酸到磁珠上同樣利用正負電荷相互作用分離外泌體的研究。然而,加電場的方法操作繁瑣,使用聚賴氨酸吸附的方法價格較為昂貴且不適合處理部分生物樣本,因此研究基于電荷的外泌體分離方法依然很有前景。殼聚糖是一種帶有氨基的天然生物活性化合物,在酸性條件下氨基與氫離子結合使殼聚糖帶正電。由于殼聚糖具有免疫增強、抗菌、抗氧化和傷口愈合等多種生物活性,且它無毒、可生物降解、生物相容性高、成本低廉,導致了其廣泛的生物醫學應用。利用殼聚糖與外泌體的正負電荷相互作用達到外泌體的分離與富集,有望為我們在外泌體研究發展及疾病檢測等方面提供一個新思路。 技術實現要素: 5.本發明的目的是提供一種基于
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