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柑桔衰退病毒侵染性克隆的構建及接種方法

905   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
2023-03-19 00:27:23
本發明公開了一種柑桔衰退病毒侵染性克隆的構建方法，步驟：(1)三個覆蓋CTV基因組全長特異片段CTV1、CTV2、CTV3的長鏈RT?PCR擴增；(2)三元穿梭載體pCY線性化；(3)TAR克?。翰捎么姿徜囖D化法將CTV1、CTV2、CTV3回收片段和線性化的三元穿梭載體pCY共轉化酵母菌YPH501；(4)轉化農桿菌；(5)農桿菌介導接種，從而鑒定獲得CTV侵染性克隆。還公開了侵染性克隆的接種方法：(1)播種：柑桔種子剝去外種皮播于培養基，暗培養；2)離心收集攜帶CTV侵染性克隆與Hc?Pro或P19表達質粒的農桿菌細胞，用接種緩沖液懸??；(3)真空浸潤；(4)暗培養。
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