本發明公開了一種過氧化物酶催化的細胞表面蛋白質標記方法。細胞外引入外源的過氧化物酶催化化學探針產生活性強、壽命短的自由基對暴露在細胞質膜外側的蛋白質基團進行選擇性共價標記。反應一段時間后,加入封閉緩沖液終止標記反應。接著,利用化學探針上的捕獲基團對標記的蛋白質進行蛋白質組學分析?;瘜W探針自由基可以與相鄰蛋白質上氨基酸,主要與酪氨酸、色氨酸、組氨酸和半胱氨酸等電子密度較高的氨基酸中的一種或二種以上發生共價連接。此標記策略操作簡單,選擇性好,反應速率快,不破壞細胞表面蛋白質的糖型,可以應用于細胞表面蛋白質組(或質膜蛋白質組)及其動態變化分析,也可以應用于細胞表面蛋白質?蛋白質相互作用以及細胞?細胞間相互作用等的研究。
聲明:
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