本發明涉及一種對人血漿DNA中RASSF1A基因甲基化的定量檢測方法。本發明取靜脈血后得血漿,制備血漿DNA標準曲線樣品,提取待測血漿DNA、標準品血漿DNA和健康人血漿DNA,對血漿DNA、標準品血漿DNA和健康人血漿DNA化學修飾,針對人RASSF1A基因啟動子區中565號CpG位點設計特異性引物和Taqman熒光探針熒光定量MSP擴增體系,以標準品血漿DNA的擴增結果制定外標準曲線,對待測樣本進行定量結果分析。解決了手術治療的腫瘤患者病程多數已經處于中晚期,手術標本的獲取創傷性大,甲基化的檢出率也相對較低等缺陷。具有靈敏度高、最低檢出限是1.5×102拷貝/ml,檢測針對RASSF1A基因啟動子區中第565號CpG位點,特異性強、獲取容易、創傷性小,能夠定量檢測血漿DNA中RASSF1A基因甲基化。
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