本發明公開了一種RT?PCR一步法擴增試劑盒抗產物污染的方法,該方法為將現有一步法RT?PCR擴增反應體系中加入特定的化學修飾的dUTP、dATP、dCTP、dGTP,以及UNG酶;同時將未經修飾的dTTP、dATP、dCTP、dGTP的終濃度均降至200nM以下,其他操作均同現有一步法RT?PCR。本發明方法在一步法RT?PCR擴增中,不僅具有很好的除產物污染效果,同時也保證了RT?PCR的靈敏度,而現有防污染方法會明顯降低RT?PCR的靈敏度,影響實驗的檢測結果。本發明方法的靈敏度與常規的無抗污染體系的靈敏度接近,可以達到普通一步法RT?PCR的檢測效果和靈敏度,并不會降低PCR的靈敏度。
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