本發明公開了一種非洲豬瘟病毒p72蛋白穩定表達細胞系及其構建方法,在將p72蛋白完成序列改造得到重組蛋白后,分別將其克隆至原核表達載體、真核表達載體,分別進行原核表達、真核表達和;其中,在原核表達的過程中,能得到穩定表達p72重組蛋白的大腸桿菌以及能得到純化后的p72重組蛋白;經過真核表達后,能得到穩定表達p72重組蛋白的CHO細胞株。利用本發明的構建方法能在2個月內篩選獲得表達非洲豬瘟病毒p72蛋白的CHO細胞株,并在沒有嘌呤霉素篩選壓力下,細胞系傳至20代,仍可檢測到外源重組蛋白,成功率為90%,具有試驗周期短、成功率高和表達成本低的優點。
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