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基于已知E1查找特異性介導靶蛋白泛素反應E2-E3的方法

906   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
2023-03-19 07:45:49
本發明涉及生物化學與分子生物學領域。具體而言,特指一種從人體細胞眾多E3中查找出特異性識別靶蛋白泛素連接酶E3和調控靶蛋白泛素化反應的E2/E3系統的方法。該方法是先建立體外泛素化分析系統,通過已知的泛素活化酶E1和以HelaS100餾分作為E3源,篩選出介導靶蛋白泛素反應的結合酶E2;再采用多重層析柱組合,結合質譜分析,從人體細胞中查找特異性識別靶蛋白的泛素連接酶E3和調控靶蛋白泛素化修飾的E2/E3系統。通過這種方法,可以方便、準確地查找出識別靶蛋白的底物識別因子-泛素連接酶E3;建立介導靶蛋白泛素化修飾的E2/E3調控系統。
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