組織金屬蛋白酶抑制因子siRNA表達載體的構建及肝硬化治療應用,本發明屬于基因工程技術領域。本發明根據siRNA的設計原理,分別選擇TIMP-1和TIMP-2編碼區的核苷酸序列,設計相應的siRNA序列,進行BLAST比較,避免與其他基因同源,化學合成單鏈寡核苷酸,體外經退火形成雙鏈DNA,與真核表達載體pGeneil-1連接,酶切鑒定和序列測定分析表明成功構建了TIMP-1和TIMP-2的siRNA表達載體,該載體經脂質體轉染肝星狀細胞(HSC),能明顯抑制TIMP-1和TIMP-2的表達;上述表達載體,通過肝硬化動物模型驗證,能明顯地降低肝組織的膠原纖維沉積,可望成為一種新型的抗肝纖維化的基因療法應用到臨床治療中。
聲明:
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