本發明公開了一種對可溶性抗體進行純化的方法。具體步驟為:首先將優化條件下誘導表達的600mL菌液離心后收集菌體,PBS重懸超聲裂解(80W,30min),離心收集裂菌上清,經ProteinL柱純化,10%SDS-PAGE監測純化的效果;10%SDS-PAGE分離純化的抗人大腸癌P-gp21Fab抗體,電轉至PVDF膜;以HRP標記的山羊抗鼠IgG抗體震蕩孵育后;ECL化學發光顯影,定影;同時將人大腸癌P-gp21經10%SDS-PAGE電泳,電轉至NC膜;純化的Fab抗體作一抗,AP標記的馬抗小鼠IgG抗體為二抗,BCIP/NBT顯色。陰性對照為pComb3裂菌上清,陽性對照為抗Histag抗體。本發明的有益效果是,實驗數據準確,可以定性、定量分析,同時為后續展開的人源化提供依據和支持。
聲明:
“對可溶性抗體進行純化的方法” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業用途,請聯系該技術所有人。
我是此專利(論文)的發明人(作者)