本發明公開了一種基于磁性納米材料和生物信號放大技術測定T4多聚核苷酸激酶活性的方法,采用水熱法制備Fe3O4@TiO2磁性核殼納米粒子,ATP和T4 PNK存在時,滾環擴增反應引物鏈S1的5′端磷酸化,修飾到Fe3O4@TiO2磁性納米粒子表面;加入環形模板S2,核酸鏈S2與Fe3O4@TiO2磁性納米粒子表面引物鏈S1雜交形成環形混合物;Fe3O4@TiO2磁性納米粒子表面發生RCA反應;加入二茂鐵標記的核酸鏈S3,Fc?S3與RCA反應產物雜交,被修飾到磁性納米粒子表面,增強電化學響應信號;通過GME的磁性富集和電化學響應信號,實現對T4 PNK活性的高靈敏和定量測定。
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