本發明提供了一種用MALDI-TOT-TOF(基質輔助激光解吸電離-串聯飛行時間)質譜對蛋白質N端序列進行從頭測序的方法和試劑盒。該方法涉及蛋白質的分離、還原烷基化、蛋白質的化學修飾、酶切肽段的質譜分析、蛋白質N端肽段的質譜識別與從頭測序。該方法對膠內蛋白質的賴氨酸進行胍基化,選擇性地將TMPP-Ac修飾在蛋白質N端氨基上;并通過加入終止試劑和洗滌。該方法所得的蛋白質N端氨基修飾物不受過量的試劑和相應的副產物的影響,與質譜技術相容。該方法可對蛋白質的N端肽進行富集,結合反相液相色譜和生物質譜技術,既容易確定蛋白質的N端肽段,又可以很方便地進行從頭測序。
聲明:
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