本發明公開了一種基于雙標記擴增的血漿循環甲基化DNA電化學檢測方法,屬于甲基化DNA檢測技術領域。本發明使用不同標記(地高辛,生物素)的甲基化特異性引物,通過聚合酶鏈式反應(PCR)鑒別亞硫酸氫鹽修飾的基因組樣品中的甲基化DNA而不是非甲基化等位基因;利用聚合酶的擴增能力,產生大量具有地高辛和生物素雙標記的雙鏈擴增子;通過修飾在金電極表面的地高辛抗體捕獲這些雙鏈擴增子;然后通過生物素?親和素結合作用捕獲辣根過氧化物酶綴合的抗生物素蛋白(Avidin?HRP),利用酶的催化過程產生電化學信號。該方法具有良好的靈敏度,能檢測5pg的甲基化DNA分子,同時具有良好的特異性,能夠在有大量非甲基化DNA干擾下檢測出1%的甲基化DNA。
聲明:
“基于雙標記擴增的血漿循環甲基化DNA電化學檢測方法及試劑盒” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究,如用于商業用途,請聯系該技術所有人。
我是此專利(論文)的發明人(作者)