本發明公開了一種單克隆抗體蛋白細胞培養液澄清的預處理方法，屬于蛋白質純化制備領域。
背景技術：
單克隆抗體(monoclonalantibody,mab)是一類重要的生物技術藥物，在現代生物檢測領域和醫療領域起著越來越重要的作用?，F有技術中，單克隆抗體通常由中國倉鼠卵巢細胞(chinesehamsterovary，cho)表達產生，隨著上游高表達細胞株的構建、基因改造、發酵條件的不斷優化，cho細胞的單克隆抗體表達量已經達到30g/l以上，培養規模也逐步擴大，伴隨著生物量以及雜質量的顯著提高，上游產能的提升給下游分離純化過程帶來極大的壓力。而高效的細胞回收液澄清預處理將大大減輕后續抗體純化的壓力，對于縮短工藝流程、提高經濟性具有決定性的作用。由此可見，評價細胞回收液澄清效果的主要標準已經逐漸轉變為不單單能有效地去除哺乳動物細胞、細胞碎片，更重要是在保證最終抗體蛋白回收率的同時，盡可能多地去除宿主細胞蛋白(hostcellprotein,hcp)、宿主殘留dna、高分子量蛋白聚集體等污染物。
傳統單克隆抗體分離純化通常包括蛋白a親和層析純化、陰陽離子交換樹脂純化、疏水性作用樹脂純化等3-4步單元操作，工藝流程長、產品產率較低，導致單克隆抗體產品成本居高不下。因此如何縮短工藝流程、降低生產成本直接決定了在當前上游產能大大提升狀況下，下游抗體分離純化的主要研究方向。離心和切向流過濾常被應用于工業中去除細胞，最近幾年深層過濾的應用也越來越廣泛。絮凝劑用來增強細胞、雜質的去除和離心的效果也越來越受到廣泛的關注。沉淀法因具有操作簡單、省時省力、回收率高等特點在抗體分離純化中應用廣泛。沉淀技術的原理是利用不同蛋白疏水性的差異，通過調節鹽濃度沉淀相應的蛋白，達到分離純化的目的。辛酸是一種飽和脂肪酸，促進酸性蛋白發生沉淀，等電點較高的單克隆抗體因具有足夠的電荷以中和辛酸的疏水作用，得以保留在上清液中，但是該方法會增加濁度和黏度，不利于分離上清液。所以本領域亟需一種更為簡單有效的沉淀法用于單克隆抗體細胞培養液的澄清以增加后續分離純化的效率。因此，本發明的目的就是提供一種操作便捷、快速高效地基于脂肪酸沉淀的單克隆抗體細胞培養液澄清的預處理方法。
技術實現要素：
為實現上述發明目的，本發明提供了一種使細胞培養液澄清的預處理方法，以去除各種宿主細胞雜質，所述方法包括以下步驟：
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聲明：
“浮選菱鎂礦礦石的藥劑制度的制作方法” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究，如用于商業用途，請聯系該技術所有人。
我是此專利(論文)的發明人(作者)
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編輯：中冶有色網
來源：鞍山鋼鐵學院
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2025年07月09日 ~ 11日 
