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人蛻膜MDSCs的分離方法

758   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
2023-03-19 08:58:51
本發明屬于生物技術領域,具體涉及一種人蛻膜MDSCs的分離方法,該分離方法包括步驟:蛻膜組織采集、蛻膜組織進一步清洗、剪碎、消化、終止消化、過濾、單個核細胞獲得、細胞貼壁、收集未貼壁細胞、MDSCs分離和流式檢測。本發明使用較溫和的Ⅳ型膠原酶進行原代消化分離,與胰酶相比,膠原酶僅對細胞間質有消化作用,避免了胰酶消化時對細胞膜蛋白的破壞作用;消化過程中加入I型DNA酶防止DNA導致的細胞凝集,且對細胞無損傷;通過使用CD33磁珠分選獲得高純度的CD33+MDSCs,與流式分選相比,磁珠分選可以在短時間內獲得大量高純度的細胞,操作簡單,避免長時間操作對細胞活性的影響和污染幾率的增加。
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