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使用家蠶制備鎮痛多肽的方法

1153   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
2023-03-19 08:20:17
本發明公開了一種使用家蠶制備鎮痛活性多肽的方法,屬于基因工程領域。所述制備方法如下:根據家蠶核型多角體病毒(BmNPV)密碼子使用頻率優化芋螺毒素ω-MVIIA基因序列,經化學合成后連入供體質粒pFastBacDual,再引入綠色熒光蛋白(EGFP)基因,構建重組供體質粒pFBD-MVIIA/EGFP。使用Bac-to-Bac方法將MVIIA/EGFP轉座到BmNPV,形成重組病毒vBmMVIIA/EGFP。將重組病毒DNA轉染至家蠶細胞,獲得BV粒子,借助綠色熒光測定BV粒子滴度后,以200?pfu的BV粒子注射家蠶,感染5天后,收獲家蠶血液。通過小鼠醋酸扭體試驗證實,表達芋螺毒素ω-MVIIA的受感染家蠶的血液具有顯著的鎮痛活性,平均扭體次數僅3.55次,明顯高于注射生理鹽水的對照組(37.30次)。本發明為表達具有鎮痛活性的芋螺毒素ω-MVIIA提供了新的方法,具有潛在的應用價值。
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