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制備增強型單體細菌熒光素酶luxAB的方法

735   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
2023-03-19 08:08:39
本發明公開了一種制備增強型單體細菌熒光素酶luxAB的方法，先獲得目的基因；構建重組表達載體；獲得含重組表達質粒的表達菌種；誘導靶蛋白的表達及蛋白的純化；檢測純化的增強型單體細菌熒光素酶的活性。本發明利用融合型熒光素酶其獨特的優勢，將luxA和luxB基因異二聚體熒光素酶基因融合并經過易錯PCR突變和化學隨機突變，篩選得到9個熒光強度增強的突變體，然后經過shuffling技術，得到一個增強型單體細菌熒光素酶基因luxAB，將其克隆到表達載體pET28a上，轉化至BL21(DE3)菌株中表達，并用溫和破碎法裂解細胞，純化表達產物，得到增強型單體細菌熒光素酶，本發明的方法過程簡單、生長周期短、成本低廉、易于純化、酶活性損失小，性能穩定，具有重要的實際應用價值。
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“制備增強型單體細菌熒光素酶luxAB的方法” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究，如用于商業用途，請聯系該技術所有人。
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