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惡性瘧原蟲HRPII蛋白單克隆抗體的制備方法

886   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
2023-03-19 07:36:06
本發明涉及一種惡性瘧原蟲HRPII蛋白單克隆抗體的制備方法,以惡性瘧原蟲HRPII蛋白為靶抗原,分析選擇A、B兩個優勢抗原表位;分別將A、B兩個優勢抗原表位重復后通過連續四個甘氨酸連接,形成重組蛋白C;采用大腸桿菌最嗜密碼子,將重組蛋白C氨基酸序列轉換為對應的核苷酸序列;化學合成上一步驟得到的核苷酸序列,并在其上下游分別添加酶切位點BamHI和EcoRI;將上一步合成得到的核苷酸片段插入表達載體PET-28a(+),構建重組蛋白C表達載體,并在大腸桿菌BL21(DE3)中誘導表達重組蛋白C;超聲破菌并低溫離心后,取溶液上清通過鎳瓊脂糖親和層析柱,洗脫得到純化重組蛋白C;重組蛋白C多次免疫Balb/c小鼠后,取其脾臟細胞與sp2/0骨髓瘤細胞融合,多輪篩選得到6株雜交瘤細胞株;純化單抗并分別標記辣根過氧化物酶(HRP),ELISA正交實驗配定最佳單抗配對組合。
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“惡性瘧原蟲HRPII蛋白單克隆抗體的制備方法” 該技術專利(論文)所有權利歸屬于技術(論文)所有人。僅供學習研究，如用于商業用途，請聯系該技術所有人。
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化學分析
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