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高效表達與制備外分泌型人源AFP的方法

777   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
2023-03-19 07:33:27
一種高效表達與制備外分泌型人源AFP的方法，該方法主要包括如下三個方面的內容：(1)利用基因合成技術合成AFP的DNA序列，再采用基因克隆和分子生物學方法構建酵母重組表達質粒PpICZ?α?A-AFP，并進行質粒抽提；(2)使用畢赤酵母表達系統體外誘導表達分泌型AFP重組蛋白，并通過優化表達時間、誘導劑添加量等條件得出最佳誘導條件；(3)優化硫酸銨分級沉淀,從發酵液上清中分離純化得到分泌到胞外的AFP重組蛋白，在55％硫酸銨濃度下目的蛋白AFP幾乎全部析出，且純度高達98.844％；本發明將純化得到的分泌重組蛋白AFP用臨床檢測電化學發光法檢測其生物活性，其值達3500ng/mL。
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