本發明提出一種實時觀測枯草芽孢桿菌生物膜生長過程中不同基因表現型細胞數量和分布的方法,包括步驟:首先采用三色熒光標記的枯草芽孢桿菌菌種,三種熒光標記顏色分別對應生物膜生長過程中三種主要的細胞基因表現型細胞;將一定數量的細胞培養溶液嫁接到特定化學成分的瓊脂培養基上,采用立體顯微鏡及相應的濾波片和紅外透射光,觀測隨著生物膜的生長不同基因表現細胞在生物膜中的分布特點及其厚度變化,并對圖片校準分析得到每一種基因表現型細胞的數量,及它們之間的轉化率以及細菌生物膜生長的幾何參數。該方法實現了在不破壞生物膜的情況下對生物膜生長過程的實時觀測,同時得到不同基因表現型細胞的數量以及分布區域。
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