本發明涉及一種檢測重組小鼠堿性成纖維細胞生長因子的免疫膠乳微球及其制備方法和應用。免疫膠乳微球由抗mbFGF蛋白多克隆抗體包被,微球顆粒50nm;制備方法是,根據原核細胞表達的優先密碼子重新修飾并構建全長mbFGF基因表達序列,將基因序列通過限制酶切割插入谷胱甘肽-S-轉移酶基因融合表達載體中并進行細菌表達,利用親合層析柱純化和凝血酶在線切割獲得mbFGF蛋白,再將佐劑溶合抗原后免疫家兔,經分離純化得到抗mbFGF多克隆抗體,將抗體通過化學偶聯法偶聯活化后的微球,得到檢測mbFGF蛋白的免疫膠乳微球。應用是,通過酶聯免疫吸附測定法,檢測mbFGF蛋白樣品,最低檢測限為mbFGF蛋白60pg/ml,相關系數R2=0.96;本發明檢測靈敏度高、操作簡單、重復性強。
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