本發明屬于生物領域,具體地涉及一種胰蛋白酶活性檢測的方法。本發明多肽在胰蛋白酶酶切前后與負載電化學活性分子硫堇的氧化石墨烯間相互作用的差異構建了一種簡便的檢測胰蛋白酶活性的方法,氧化石墨烯具有較大的比表面積,可以負載大量的硫堇,起到電化學信號放大的,提高檢測的靈敏度;本發明通過底物多肽通過末端半胱氨酸的巰基與金形成金巰鍵共價修飾到金電極表面,帶有巰基的多肽共價修飾至金表面,然后用巰基己醇占位,去除非特異性吸附的多肽,封閉電極表面空白位置,底物多肽序列N末端組氨酸,組氨酸帶正電荷,富含羧基的氧化石墨烯解離后帶負電荷,兩者之存在較強的靜電相互作,從而使所制備得到的復合物吸附至最終修飾電極產物。
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