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基于高精度質譜的蛋白類泛素化修飾位點檢測方法及應用

889   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
2023-03-19 07:06:47
本發明公開了一種基于高精度質譜的蛋白類泛素化修飾位點檢測方法及應用,所述蛋白類泛素化修飾位點檢測方法包括以下步驟:步驟S1:構建獲得體外SUMO化修飾反應體系,以獲得目標蛋白;步驟S2:對步驟S1所獲得的目標蛋白進行胰蛋白酶酶切,獲得酶切后的多肽肽段;步驟S3:將步驟S2獲得的多肽通過液相色譜質譜聯用分析采集得到多肽質譜數據,經數據解析,得到修飾位點以及核心肽段的序列;步驟S4:化學合成含有SUMO化修飾位點的同位素標記肽段序列,采用PRM方法進行位點確證,確定一套母?子離子對;步驟S5:用步驟S4建立的母?子離子對對內源修飾位點進行檢測;所述SUMO化修飾是指SUMO1類泛素化修飾。
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