本發明提供了一種檢測乙酰輔酶A羧化酶活性的方法,屬于生物化學和分子生物學領域。乙酰輔酶A羧化酶活性檢測的原理主要是通過酶促反應體系中丙二酸單酰輔酶A或ADP濃度的變化反映酶的活性。已有的方法由于涉及到放射性同位素的使用,以及受到ATP酶的潛在影響,存在安全性、特異性差等問題。本方法的特征在于制備含有乙酰輔酶A羧化酶的蛋白制品或樣品上清液后,與乙酰輔酶A、ATP及NaHCO3等構成體外反應系統,再通過酶聯免疫吸附分析的方法檢測一定時間內丙二酸單酰輔酶A濃度的變化,從而計算樣品中酶活性的大小。本方法不使用放射性同位素、特異性高、易操作,適用于各種生物樣品中乙酰輔酶A羧化酶活性的分析。
聲明:
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