本發明公開了一種基于連續識別與級聯放大系統的血漿游離DNA甲基化電化學檢測方法及試劑盒,使用不同濃度的生物素標記的甲基化特異性引物,通過此不對稱的MSP鑒別亞硫酸氫鹽修飾的基因組樣品中的甲基化DNA而不是非甲基化等位基因;利用聚合酶的擴增能力,加入不同濃度的引物,產生大量具有生物素標記的單鏈擴增子,減少了引物二聚體的干擾;通過修飾在金電極表面上的自組裝四面體上的DNA納米結構探針捕獲這些擴增子;通過生物素?親和素結合作用捕獲辣根過氧化物酶綴合的抗生物素蛋白,利用酶的催化過程產生電化學信號。該方法具有良好的靈敏度,能檢測單個拷貝的甲基化DNA分子,同時具有良好的特異性,能夠在有大量非甲基化DNA干擾下檢測出0.1%的甲基化。
聲明:
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