本發明公開了一種基于恒溫無酶多級擴增的miRNA化學發光檢測試劑盒,通過核酸互補雜交,目標miRNA特異性地打開發卡探針,發生催化發卡自組裝反應,生成大量雙鏈DNA產物,雙鏈產物繼續引發雜交鏈式反應,形成含有多個G?四鏈體的DNA納米線,G?四鏈體與氯化血紅素結合形成具有類辣根過氧化物酶催化活性的G?四鏈體/氯化血紅素DNAzyme。在過氧化氫的存在下,DNAzyme催化魯米諾的氧化反應,產生多級擴增的化學發光信號。本發明試劑盒可以檢測低至16 pM的miRNA;該檢測方法無需熒光基團修飾、外部光源和蛋白酶介入,通過多級擴增反應即可有效提高miRNA檢測的靈敏度,從而解決了現有檢測方法由于自發熒光、熒光漂白、串光以及穩定性低導致的靈敏度有限的難題。
聲明:
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