禽流感病毒RT-PCR ELISA診斷方法及應用該方法的試劑盒

本發(fā)明提供了根據流感病毒保守的M基因設計了特異性引物，借助生物素與鏈霉親和素特異性結合的原理，使生物素標記的PCR產(chǎn)物結合到酶標板上，之后加入抗地高辛的過(guò)氧化物酶，最后加TMB顯色液，陽(yáng)性產(chǎn)物即可顯色；在此基礎上本發(fā)明成功研制了專(zhuān)用試劑盒。該方法將PCR和高靈敏度的地高辛檢測系統相結合，敏感性比常規瓊脂糖凝膠電泳檢測方法高l00倍以上，而且特異性強，克服了組織樣品中AIV含量少而難以檢測的困難，與病毒分離方法相比符合率可達95%以上，且排除了化學(xué)試劑(如溴化乙錠)的污染，有利于自動(dòng)化，適于大量樣本的檢測，為禽流感的早期診斷和分子流行病學(xué)調查提供了一條新途徑。