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RNA介導的DNA連接及在片延伸標記檢測RNA病毒方法

1218   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
2023-03-19 07:11:29
本發明涉及生物醫學領域中病毒檢測微陣列芯片的方法,具體為一種RNA介導的DNA連接及在片延伸標記檢測RNA病毒方法。其特點是:以待檢測病毒核酸序列為模板設計特異性檢測探針,檢測探針按兩部分進行化學合成。如果“靶”病毒存在,則其檢測探針的兩部分可通過T4DNA連接酶連接。連接后的檢測探針與固定在芯片上的其相應的捕獲探針雜交,以連接后的檢測探針為模板,以捕獲探針為引物,進行在片DNA多聚酶聚合(包括Cy3-dUTP)反應產生熒光信號。如果“靶”病毒不存在,則無熒光信號產生。該方法檢測的靈敏性比ELISA高十倍,檢測的最小稀釋濃度為萬分之一(10□4,感染提取液/無感染提取液)。以病毒基因組為信息載體設計特異性檢測探針、以基于靶RNA(所檢病毒RNA)為模板的檢測探針的連接、芯片雜交和在片DNA聚合酶延伸標記反應等實驗,建立一種操作方便的病毒檢測芯片方法。
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