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重組人甲狀旁腺激素在大腸桿菌中的構建、表達與純化方法

779   編輯：管理員   來源：中冶有色網  
2023-03-19 08:56:59
本發明涉及醫藥生物工程技術領域，是包括涉及 編碼人甲狀旁腺激素小肽的cDNA，和利用其表達載體制備人 甲狀旁腺激素的方法。本發明將化學合成的重組人甲狀旁腺激 素(1－34)基因用PCR擴增后，克隆至表達載體pET－35b(+)， 使重組人甲狀旁腺激素(1－34)融合于纖維素結合結構域 (CBDclos)的羧基端，并得到高效 表達。融合蛋白經纖維素樹脂親和層析純化后，經Factor Xa 裂解釋放出rhPTH(1－34)，再通過纖維素樹脂親和層析、C4 反向高效液相色譜純化得到rhPTH(1－34)純品。每升培養液可 獲取3mg高純度的rhPTH(1－34)。經質譜測定，所得樣品的 分子量為4117.0道爾頓，與rhPTH(1－34)理論分子量一致。 本發明極大程度上豐富了該多肽在醫藥生物工程技術領域的 研究和開發。
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