本發明的目的在于提供一種利用畢赤酵母菌表達抗菌肽T9W的方法。編碼抗菌肽T9W的DNA序列,如SEQ?ID?No.1所示,并將該基因序列克隆到畢赤酵母表達載體pPICZαA中,構建重組表達載體pPICZαA?T9W經雙酶切及測序驗證,驗證正確后保存于E.coli?Top?10。用電轉化方法將質粒轉入到畢赤酵母菌X?33感受態細胞中,陽性轉化子在誘導劑的作用下,實現抗菌肽的分泌表達。為進一步擴大發酵提供理論依據。本專利選用畢赤酵母作為抗菌肽T9W的表達宿主,完成了T9W的體外表達,本發明有效降低了抗菌肽T9W的生產成本,表達量高達13mg/L,實現了抗菌肽T9W的高效表達,克服了大規模生產中產量過低或化學合成成本過高的問題。
聲明:
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我是此專利(論文)的發明人(作者)