利用畢赤酵母菌制備抗菌肽T9W的方法

本發(fā)明的目的在于提供一種利用畢赤酵母菌表達抗菌肽T9W的方法。編碼抗菌肽T9W的DNA序列，如SEQ?ID?No.1所示，并將該基因序列克隆到畢赤酵母表達載體pPICZαA中，構建重組表達載體pPICZαA?T9W經(jīng)雙酶切及測序驗證，驗證正確后保存于E.coli?Top?10。用電轉化方法將質(zhì)粒轉入到畢赤酵母菌X?33感受態(tài)細胞中，陽(yáng)性轉化子在誘導劑的作用下，實(shí)現抗菌肽的分泌表達。為進(jìn)一步擴大發(fā)酵提供理論依據。本專(zhuān)利選用畢赤酵母作為抗菌肽T9W的表達宿主，完成了T9W的體外表達，本發(fā)明有效降低了抗菌肽T9W的生產(chǎn)成本，表達量高達13mg/L，實(shí)現了抗菌肽T9W的高效表達，克服了大規模生產(chǎn)中產(chǎn)量過(guò)低或化學(xué)合成成本過(guò)高的問(wèn)題。