本發明公開了一種新型反相/弱陽離子交換混合模式色譜固定相及其制備方法。所述反相/弱陽離子交換混合模式色譜固定相的結構式如式Ⅰ所示。所述反相/弱陽離子交換混合模式色譜固定相的制備方法包括如下步驟:1)乙烯基硅烷偶聯劑與球形硅膠表面的硅羥基經硅烷偶聯反應,得到式Ⅱ所示化合物;2)式Ⅱ所示化合物與半胱氨酸經巰基?烯點擊化學反應,得到式Ⅲ所示化合物;3)式Ⅲ所示化合物與異氰酸十八酯反應經氨基與異氰酸基團之間的反應即得。由于本發明反相/弱陽離子交換混合模式色譜固定相鍵合有親水性基團,使其疏水性減弱,因此能夠解決肽段疏水性太強而引起的不可逆吸附的問題,使蛋白質組的定性定量分析結果更加準確。
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