本發明公開了一種提高咖啡酸產量的菌株的制備方法和催化應用,選取一種出發質粒,在質粒的酶切位點連接單加氧酶基因HpaBC,獲得環形質粒pHG04,以獲得的環形質粒pHG04為模板,在其酶切位點連接脫氫酶基因FDH,獲得環形重組質粒pHG05,再以大腸桿菌代謝菌為出發菌株,通過化學轉化法導入環形重組質粒pHG05,獲得構建重組菌株sHG05;以構建重組菌株sHG05作為生物酶,經過細胞培養并誘導,再催化4?香豆酸制備咖啡酸,并檢測咖啡酸的產量。本發明以大腸桿菌代謝菌為出發菌株,通過化學轉化法導入重組質粒pHG05,獲得一種新的生產咖啡酸的菌株,可作為生物酶催化4?香豆酸制備咖啡酸,能夠為反應過程提供了充足的胞內輔酶,降低底物殘留,提高咖啡酸產量。
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