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基因或核酸序列的酶切-連接長序列半合成方法

894   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
2023-03-19 07:31:48
本發明涉及基因或核酸序列的酶切-連接長序列半合成方法,是通過以下步驟實現的,目標基因或核酸序列分析:對要求合成或獲得的目標序列進行分析,設計分段化學合成的片段長度、分割位點;目標基因或核酸序列的片段化學合成:根據上述分析的結果,用化學合成法合成目標基因或脫氧核糖核酸序列的片段,在合成時人為引入適當的限制性內切酶識別位點;目標基因或核酸序列各片段的限制性酶切反應:用能夠識別上述位點的限制性內切酶進行酶切反應,產生含有粘性末端的片段;目標基因或核酸序列各片段的正確連接:用適當連接酶對分段合成的基因或核酸序列的片段進行常規的酶促連接反應;可獲得10000個堿基對,最長達到13000堿基對;并且錯誤率低、成本也低。
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