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乳腺癌細胞C35基因siRNA表達載體的構建以及抗腫瘤治療應用

1159   編輯:管理員   來源:中冶有色網  
2023-03-19 07:31:06
本發明屬基因工程技術領域,具體地說是乳腺癌細胞C35基因siRNA序列的設計,表達載體的構建及其在抗腫瘤治療中的應用。本發明根據siRNA的設計原則,分別選擇C35蛋白編碼區259nt-278nt,編碼區282nt-300nt的核苷酸序列,設計相應的siRNA,用BLAST軟件進行同源分析證實為C35高度保守序列后,化學合成單鏈寡核苷酸,體外經退火形成雙鏈DNA,與真核表達載體pTZU6+1連接,酶切鑒定和序列測定分析表明成功構建了兩種靶向C35基因序列的siRNA表達載體。上述表達載體通過陽離子脂質體介導轉染乳腺癌細胞T47D后,采用RT-PCR和Western?Blot實驗以及MTT、TUNEL利Annexin?V/PI流式細胞分析法實驗均證實C35siRNA具有較強抑制乳腺癌細胞生長的作用,可以在制備抗腫瘤的藥物中應用。
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