本發明屬于生物工程技術領域,具體為一種紅豆杉愈傷轉化過程中農桿菌侵染的方法。本發明把紅豆杉下胚軸作為外植體誘導愈傷組織,并經過培養獲得胚性愈傷;用根癌農桿菌介導,采用農桿菌浸潤的刀片切割紅豆杉愈傷組織,將帶有GUS基因的pCAMBIA1304質粒導入紅豆杉愈傷組織,PCR檢測外源潮霉素磷酸轉移酶基因(HPT)的整合情況,組織化學方法檢測GUS基因在組織中的表達情況,獲得紅豆杉的轉基因愈傷組織;其中,刀面接觸在愈傷組織的切面上形成一定的菌液梯度,從而覆蓋轉化所需的最佳菌液濃度,確保細胞得到成功轉化,提高農桿菌轉化的成功率,為紅豆杉愈傷組織開展高效地遺傳轉化工程奠定的基礎。
聲明:
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